Kifaa cha Kugundua Mabadiliko ya Jeni la Binadamu la EGFR Gene 29 (Fluorescence PCR)-RUO
Jina la bidhaa
Kifaa cha Kugundua Mabadiliko ya Jeni la Binadamu la EGFR Gene 29 (Fluorescence PCR)-RUO
Epidemiolojia
Saratani ya mapafu imekuwa chanzo kikuu cha vifo vya saratani duniani kote, ikitishia afya ya binadamu kwa kiasi kikubwa. Saratani ya mapafu isiyo ya seli ndogo inachangia takriban 80%-85% ya wagonjwa wa saratani ya mapafu. EGFR kwa sasa ndiyo shabaha muhimu zaidi ya molekuli kwa ajili ya matibabu ya saratani ya mapafu isiyo ya seli ndogo. Fosforasi ya EGFR inaweza kukuza ukuaji wa seli za uvimbe, utofautishaji, uvamizi, metastasis, kupambana na apoptosis, na kukuza angiogenesis ya uvimbe. Vizuizi vya tyrosine kinase vya EGFR (TKI) vinaweza kuzuia njia ya ishara ya EGFR kwa kuzuia autofosforasi ya EGFR, na hivyo kuzuia kuenea na utofautishaji wa seli za uvimbe, kukuza apoptosis ya seli za uvimbe, kupunguza angiogenesis ya uvimbe, n.k., ili kufikia tiba inayolenga uvimbe [1]. Idadi kubwa ya tafiti zimeonyesha kuwa ufanisi wa matibabu wa EGFR-TKI unahusiana kwa karibu na hali ya mabadiliko ya jeni ya EGFR, na unaweza kuzuia haswa ukuaji wa seli za uvimbe na mabadiliko ya jeni ya EGFR [2,3]. Jeni la EGFR liko kwenye mkono mfupi wa kromosomu 7 (7p12), lenye urefu kamili wa 200Kb na lina eksoni 28. Eneo la mabadiliko liko zaidi katika eksoni 18 hadi 21, mabadiliko ya ufutaji wa kodoni 746 hadi 753 kwenye eksoni 19 yanachangia takriban 45% na mabadiliko ya L858R kwenye eksoni 21 yanachangia takriban 40% hadi 45% [4]. Miongozo ya NCCN ya Utambuzi na Matibabu ya Saratani ya Mapafu Isiyo Ndogo ya Seli Ndogo inasema wazi kwamba upimaji wa mabadiliko ya jeni la EGFR unahitajika kabla ya utawala wa EGFR-TKI. Kifaa hiki cha majaribio kinatumika kuongoza usimamizi wa dawa za kuzuia ukuaji wa seli za ngozi (EGFR-TKI), na hutoa msingi wa dawa za kibinafsi kwa wagonjwa walio na saratani ya mapafu isiyo ya seli ndogo. Kifaa hiki kinatumika tu kwa kugundua mabadiliko ya kawaida katika jeni la EGFR kwa wagonjwa walio na saratani ya mapafu isiyo ya seli ndogo. Matokeo ya kipimo ni kwa ajili ya marejeleo ya kimatibabu pekee na hayapaswi kutumika kama msingi pekee wa matibabu ya kibinafsi ya wagonjwa. Madaktari wanapaswa kuzingatia hali ya mgonjwa, dalili za dawa, na matibabu. Mwitikio na viashiria vingine vya majaribio ya maabara na mambo mengine hutumika kuhukumu kwa kina matokeo ya kipimo.
Kituo
| Kibao cha Mwitikio | Kituo |
| Kibao cha Mmenyuko cha IC cha EGFR | Kituo cha FAM |
| Kizuizi cha Mmenyuko cha L858R | Kituo cha FAM |
| Kizuizi cha Mmenyuko cha 19del | Kituo cha FAM |
| Kizuizi cha Mmenyuko cha T790M | Kituo cha FAM |
| Kizuizi cha Mmenyuko cha G719X | Kituo cha FAM |
| Kifaa cha Kurekebisha Majibu cha 3Ins20 | Kituo cha FAM |
| Kizuizi cha Mmenyuko cha L861Q | Kituo cha FAM |
| Kizuizi cha Mmenyuko cha S768I | Kituo cha FAM |
Vigezo vya Kiufundi
| Hifadhi | Kioevu: ≤ -18℃ Katika giza |
| Muda wa kukaa rafu | Miezi 12 |
| Aina ya Sampuli | tishu mpya za uvimbe, sehemu iliyogandishwa ya kiitolojia, tishu au sehemu ya kiitolojia iliyopachikwa na parafini, plasma au seramu |
| CV | ＜5.0% |
| LoD | kugundua myeyusho wa mmenyuko wa asidi ya kiini chini ya msingi wa aina ya mwitu ya 3ng/μL, kunaweza kugundua kwa utulivu kiwango cha mabadiliko ya 1%; b) mmenyuko wa asidi ya kiini Chini ya kiwango cha mabadiliko ya 1%, mabadiliko ya 1×103Nakala/mL yanaweza kugunduliwa kwa utulivu katika mandharinyuma ya aina ya mwitu ya 1×105Nakala/mL; c) Suluhisho la mmenyuko wa marejeleo ya ndani linaweza kugundua bidhaa ya marejeleo SW3 yenye kikomo cha chini kabisa cha ugunduzi wa marejeleo ya ndani ya biashara. Wakati kit kinagundua nyenzo ya marejeleo ya kikomo cha ugunduzi wa kitaifa, nyenzo ya marejeleo ya kikomo cha ugunduzi wa masafa ya mabadiliko ya 2.5% na mabadiliko ya ukuzaji wa jeni ya EGFR yenye tofauti ya nambari ya nakala ya 4 yanaweza kugunduliwa kwa utulivu. |
| Umaalum | Hakuna mwingiliano kati ya DNA ya jenomu ya binadamu ya aina ya mwitu na aina zingine za mutant |
| Vyombo Vinavyotumika | Mifumo ya Biosystems 7500 ya Muda Halisi ya PCR, Mifumo ya Biosystems 7300 ya Muda Halisi ya PCR, Mifumo 5 ya PCR ya Wakati Halisi ya QuantStudio®, Mfumo wa PCR wa LightCycler® 480 wa Muda Halisi, Mfumo wa PCR wa BioRad CFX96 wa Muda Halisi. |
Mtiririko wa Kazi
Vitendanishi vinahitajika lakini havijatolewa:Maji Isiyo na DNase/RNase, ethanoli isiyo na maji. Unapojaribu sampuli ya tishu iliyopachikwa parafini, inashauriwa kutumia Kitengo cha Tishu cha QIAamp DNA FFPE (56404) na QIAGEN na Kitengo cha Uchimbaji Haraka wa DNA ya Tishu ya Parafini (DP330) na Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd.. Unapojaribu sampuli ya plasma/seramu, inashauriwa kutumia Kitengo cha Jumla cha DNA/RNA cha Macro & Micro-Test (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (ambacho kinaweza kutumika na Kitoa Asidi ya Nyuklia ya Macro & Micro-Test Automatic (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) na Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. au Kitengo cha Asidi ya Nyuklia ya QIAamp Circulating (55114) na QIAGEN.
Vifaa vya matumizi vinahitajika lakini havijatolewa: Vidokezo Visivyo na DNase/RNase, glavu zinazoweza kutupwa, Mrija wa Sentrifuge Usio na DNase/RNase, vipande vya mirija 8 vya PCR, sentrifuge.
